废水检测

水样中有机物在20℃避光条件，经微生物 5 天生化降解，消耗水中溶解氧；测定培养前后水样溶解氧差值，即为五日生化需氧量 BOD₅。 稀释接种法适用场景：废水含有机物浓度高、本身微生物不足（如消毒废水、化工废水），需要外加接种微生物才能完成降解。

试剂配制（标准规定）

1. 四种盐储备液（配制稀释水用）

磷酸盐缓冲溶液：pH=7.2；磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、十二水磷酸氢二钠、氯化铵溶于纯水。

硫酸镁溶液（22.5 g/L）：硫酸镁 (MgSO₄・7H₂O) 22.5g 溶于 1L 纯水。

氯化钙溶液（27.5 g/L）：无水氯化钙 27.5g 溶于 1L 纯水。

氯化铁溶液（0.25 g/L）：六水氯化铁 0.25g 溶于 1L 纯水。

2. 稀释水配制

每升纯化水，分别加入以上 4 种盐溶液各 1.0 mL，混匀；曝气至 DO 接近饱和，开口静置 1h，24h 内用完，pH 控制 7.2。

3. 接种稀释水（稀释接种法核心）

在稀释水中加入接种液：

城市污水 / 污水厂出水：每 L 稀释水加 1～10 mL 接种液

河水湖水：每 L 稀释水加 10～100 mL 接种液 要求：pH7.2，接种稀释水 BOD₅＜1.5 mg/L；现配现用，20±1℃保存湖北省生态...。

接种液来源：生活污水、污水处理厂出水、表层河水；也可商用成品接种菌液。

4. 其他试剂

盐酸 0.5 mol/L、NaOH0.5 mol/L：用于调节水样 pH（水样 pH 应调至 6.5～7.5）

丙烯基硫脲（ATU）硝化抑制剂：抑制硝化细菌干扰，每升培养液添加 2 mL

葡萄糖 - 谷氨酸标准溶液（质控样）：用于验证接种液活性；标准质控目标：BOD₅ 180～230 mg/LMINISTRY O...

样品前处理与稀释配比（HJ505-2009）

水样预处理：水样温度调至 20±2℃；DO 过低需要曝气；DO 过饱和需要振荡赶氧；水样含强酸强碱，用稀盐酸 / NaOH 调 pH 至 6.5～7.5。

稀释倍数选择原则： 培养后剩余 DO≥2 mg/L，DO 消耗≥2 mg/L；最佳区间：剩余 DO 为初始 DO 的 1/3～2/3。

稀释倍数参考：可按 CODcr 估算，BOD₅≈0.4~0.6 CODcr，预估 BOD 再确定稀释倍数。

稀释操作：用接种稀释水稀释水样；同一水样建议做2～3 个不同稀释倍数，保证至少一组落在有效 DO 区间。

示例：预估水样 BOD₅约 200 mg/L，选用稀释倍数 20 倍 取 5 mL 原废水，加入接种稀释水定容至 100 mL，混匀，装入溶解氧瓶，水封。

测试流程

稀释配样：水样 + 接种稀释水装入 BOD 溶解氧瓶，水封，不留气泡；同时配制接种稀释水空白样。

测定培养前 DO（DO₁）。

放入 20±1℃恒温培养箱，避光培养 5 天；培养期间保持瓶口水封。

5 天后测定培养后 DO（DO₂）。

空白同步测定接种稀释水培养前后 DO：\\(ρ_3\\)（培养前）、\\(ρ_4\\)（培养后）

质控要求

葡萄糖 - 谷氨酸质控样：BOD₅应落在 180～230 mg/L，验证接种液活性。

平行样相对偏差：

BOD₅≤3 mg/L：≤±15%

3＜BOD₅≤100 mg/L：≤±20%

BOD₅＞100 mg/L：≤±25%MINISTRY O...

空白：接种稀释水 BOD₅必须＜1.5 mg/L。

关键注意要点

稀释接种法用于微生物不足的废水；生活污水自带足够微生物，可直接用普通稀释法，不用外加接种液。

稀释、装瓶全程不能带入气泡；瓶口必须水封，防止氧气交换。

含有毒物质废水（重金属、杀菌剂）会抑制微生物，测试结果偏低，需评估毒性影响。

水样采集后尽快检测；冷藏保存（0～4℃），最长不超过 24h。